Проточная цитометрия — Клеточный анализ с применением лазерных технологий

Проточная цитометрия представляет собой аналитическую методику, измеряющую светорассеяние и флуоресценцию, испускаемые единичными клетками при их прохождении поодиночке через зону оптической детекции. Клетки крови, костного мозга или суспензии тканей метят моноклональными антителами, конъюгированными с флуоресцентными красителями, которые связываются со специфическими поверхностными, цитоплазматическими или ядерными антигенами — так называемыми маркерами дифференцировки (CD-маркерами).

Когда меченая клетка пересекает лазерный луч, свет рассеивается вперед и вбок, что позволяет судить о размере клетки и ее внутренней структуре, а детекторы флуоресценции регистрируют интенсивность связывания специфических антител. Полученные многопараметрические данные позволяют врачам-гематопатологам с высочайшей точностью идентифицировать, количественно оценивать и характеризовать различные субпопуляции иммунных и опухолевых клеток за считанные минуты.

Проточная цитометрия имеет принципиальное значение для точной диагностики опухолей крови, позволяя определить, какой именно росток кроветворения дал начало злокачественному процессу. Она позволяет разделять заболевания, выглядящие одинаково под обычным микроскопом, на четкие подтипы, требующие совершенно разного лечения. Кроме того, ее исключительная чувствительность делает метод незаменимым инструментом для оценки минимальной (измеряемой) остаточной болезни (MRD), обнаруживая микроскопические следы оставшихся после лечения опухолевых клеток для подтверждения истинной ремиссии или прогнозирования раннего рецидива.

Проточная цитометрия представляет собой лабораторное исследование, выполняемое на образцах крови, аспирата костного мозга, спинномозговой жидкости или тонкоигольных пунктатов. Анализируются расширенные панели диагностических CD-маркеров, таких как CD3, CD4 и CD8 для T-лимфоцитов; CD19, CD20 и CD22 для B-лимфоцитов; CD33, CD34 или CD117 для миелоидных предшественников, что позволяет отличить опухолевые клоны от здоровых клеточных аналогов.

Проточная цитометрия применяется преимущественно в онкогематологии. Она является стандартом диагностики и мониторинга острого миелоидного лейкоза (AML), острого лимфобластного лейкоза (ALL), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL), множественной миеломы, миелодиспластических синдромов и различных форм лимфомы Ходжкина и неходжкинских лимфом.

Иммунофенотип, определенный методом проточной цитометрии, напрямую определяет выбор таргетного лечения. Например, выраженная экспрессия CD20 при B-клеточной лимфоме указывает на необходимость включения в схему терапии анти-CD20 моноклональных антител, таких как rituximab. Выявление определенных комбинаций маркеров направляет пациентов на таргетную терапию, инфузии CAR-T-клеток или аллогенную трансплантацию стволовых клеток, а мониторинг MRD после проведенного лечения помогает врачам решить, стоит ли интенсифицировать терапию или можно безопасно снизить ее объем.